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產(chǎn)品目錄

百迪大(?。┦笸庵苎馨图?xì)胞分離液(贈樣本稀釋液、清洗液)200ml

品名: 百迪大(小)鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液(贈樣本稀釋液、清洗液)200ml
型號: S1041-200
  • 產(chǎn)品詳情
  • 規(guī)格參數(shù)

產(chǎn)品信息

適用范圍試劑
使用方法根據(jù)血液樣本,分以下兩種情況:
情況 A:血液樣本量 0.5-2.0ml 時,實(shí)驗(yàn)方法如下:
1. 取一支 10ml 無菌硅化離心管,加入 4ml 分離液,再緩慢加入 0.5-2.0ml 血液樣本。血 液樣本小心加于分離液液界面之上。(分離液不得少于 3ml,血液樣本不得少于 0.5ml);
2. 以 450g ,離心 30min。(注:如改變血液樣本及分離液用量,需相應(yīng)調(diào)整離心力及離 心時間。);
3. 離心后,離心管中由上至下分為四層。第一層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色(大/小鼠) 淋巴細(xì)胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細(xì)胞層。
4. 小心吸取血漿層轉(zhuǎn)移到新離心管中標(biāo)記為 A。小心吸取離心管中的環(huán)狀乳白色(大/小鼠) 淋巴細(xì)胞層轉(zhuǎn)移到新離心管中標(biāo)記為 B。
5. 向含有(大/小鼠)淋巴細(xì)胞的離心管 B 中,加入 10ml 清洗液,混勻細(xì)胞。
6. 250g,離心 10min,棄去上清。
7. 用吸管吸取 5ml 清洗液重懸所得細(xì)胞。
8. 250g,離心 10min,棄去上清。
9. 重復(fù)清洗兩次,棄去上清,用 0.5ml 清洗液或根據(jù)下一步實(shí)驗(yàn)需求加入相對應(yīng)液體,重 懸所得細(xì)胞。
情況 B:血液樣本量 2.0-4.0ml 時,實(shí)驗(yàn)方法如下:
1. 取 15ml 的無菌離心管,小心加入 5ml 分離液,加入血液樣本量 2.0-4.0ml。血液樣本 小心加于分離液界面之上。(總液體量不得超過 2/3)
2. 以 500g,離心 30min。(注:根據(jù)血液樣本量確定離心條件,血液量越多,離心力越 大,離心時間越長,具體離心條件需客戶自行摸索,以達(dá)到最佳分離效果。)
3. 離心后,離心管中由上至下分為四層。第一層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色(大/小鼠) 淋巴細(xì)胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細(xì)胞層。
4. 小心吸取血漿層轉(zhuǎn)移到新離心管中標(biāo)記為 A。小心吸取離心管中的環(huán)狀乳白色(大/小鼠) 淋巴細(xì)胞層轉(zhuǎn)移到新離心管中標(biāo)記為 B 。
5. 向含有(大/小鼠)淋巴細(xì)胞的離心管 B 中,加入 10ml 清洗液,混勻細(xì)胞。
6. 250g,離心 10min,棄去上清。
7. 用吸管吸取 5ml 清洗液重懸所得細(xì)胞。
8. 250g,離心 10min,棄去上清。
9. 重復(fù)清洗兩次,棄去上清,用 0.5ml 清洗液或根據(jù)下一步實(shí)驗(yàn)需求加入相對應(yīng)液體,重 懸所得細(xì)胞。
分離過程中可能出現(xiàn)的情況及處理方案:
淋巴細(xì)胞層混雜紅細(xì)胞:
1. 吸取有紅細(xì)胞混雜的淋巴細(xì)胞層。
2. 取 15 毫升離心管加入紅細(xì)胞混雜的淋巴細(xì)胞,根據(jù)紅細(xì)胞殘余數(shù)量酌情加入 5-8 倍紅 細(xì)胞裂解液,少時多次裂解后獲得淋巴細(xì)胞。
注意事項(xiàng)1. 本產(chǎn)品使用前,請先顛倒混勻,并在無菌環(huán)境下打開使用。
2. 試劑包裝如有破損或滴漏,嚴(yán)禁使用。
3. 分離時最好不要使用高聚合材質(zhì)(如聚苯乙烯)的塑料制品,應(yīng)使用無靜電、低靜電離心 管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品,避免細(xì)胞掛壁,影響分離效果。
4. 本產(chǎn)品嚴(yán)禁冷藏。低溫容易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。
5. 為達(dá)到實(shí)驗(yàn)的最佳效果,推薦在取血 2h 內(nèi)分離,如達(dá)不到 2 小時內(nèi)分血條件,請務(wù)必 4 小時內(nèi)進(jìn)行分血步驟,超過 4 小時很難順利進(jìn)行分離。
6. 吸取過多的淋巴細(xì)胞層及分離液層會導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的粒 細(xì)胞數(shù)量增加。
7. 吸取過多的淋巴細(xì)胞層上層溶液會導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜。
8. 不當(dāng)?shù)南♂尫椒〞档图?xì)胞得率及活性。稀釋液要求:不含鈣鎂離子的緩沖液或培養(yǎng)基。 血液樣本經(jīng)過稀釋則分離過程中需適當(dāng)降低離心力和離心時間。
9. 使用水平轉(zhuǎn)子離心機(jī),離心機(jī)使用時調(diào)整為慢升慢降,建議升速的時間、降速時間均控 制在 3 分鐘左右。
10. 禁止使用超出規(guī)定有效期的產(chǎn)品。
聲明僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。
保存條件室溫避光儲存,有效期24個月。

產(chǎn)品詳情

外周血細(xì)胞包括白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板三類,而白細(xì)胞是粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的 總稱。由于外周血中,不同血細(xì)胞的形態(tài)、大小以及比重不同,利用密度梯度離心法分離后, 至上而下分別為血漿層、外周血單核細(xì)胞層、淋巴細(xì)胞分離液層、紅細(xì)胞以及粒細(xì)胞層。 BDBIO 大(?。┦笸庵苎馨图?xì)胞分離液經(jīng)過一定的配方優(yōu)化和改良,和大(?。┦笸庵苎?近于等滲,對于淋巴細(xì)胞分離的提取率大于 80%。


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